來源：正道高級完全中學 發布時間：2014-05-28 11:11:39 瀏覽：9459
實驗三 用顯微鏡觀察多種多樣的細胞（必修一P7）
一．實驗目的：
1）使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞，比較不同細胞的異同點
2）運用制作臨時裝片的方法
二．實驗原理：
利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細胞結構，例如：可以看到葉綠體、線粒體等細胞器，從而能夠區別不同的細胞。
三．方法步驟：
第一步：轉動反光鏡使視野明亮
第二步：在低倍鏡下觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野中央
第三步：用轉換器轉過高倍物鏡
問（1）是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？
提示：低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數小；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數高。
問（2）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？
提示：如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。
問（3）用轉換器轉過高倍鏡后，轉動粗準焦螺旋行不行？
提示：不行。用高倍鏡觀察，只需微調即可。轉動粗準焦螺旋，容易壓壞玻片。
第四步：觀察并用細胞準焦螺旋調焦。
四：討論：
1.使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么？
答：（1）首先用低倍鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野的中央。
（2）轉動轉換器，用高倍鏡觀察，并輕輕轉動細準焦螺旋，直到看清楚材料為止。
2.試歸納所觀察到的細胞在結構上的共同點，并描述它們之間的差異，分析產生差異的可能的原因：
答：這些細胞在結構上的共同點是：有細胞膜、細胞質和細胞核，植物細胞還有細胞壁。
各種細胞之間的差異和產生差異的可能原因是：這些細胞的位置和功能不同，其結構與功能相適應，這是個體發育過程中細胞分化產生的差異。
3.P8圖是一個大腸桿菌的電鏡照片和結構模式圖，大腸桿菌與你在本實驗中觀察到的細胞有什么主要區別？
答：從模式圖中可以看出，大腸桿菌沒有明顯的細胞核，沒有核膜，細胞外有鞭毛，等等。
實驗四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體（必修一P47）
一．實驗目的：
使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態分布。
二．實驗原理：
葉綠體的辨認依據：葉綠體是綠色的，呈扁平的橢圓球形或球形。
線粒體辨認依據：線粒體的形態多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。
健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中線粒體呈現藍綠色。
三．實驗材料：
觀察葉綠體時選用：蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是：葉子薄而小，葉綠體清楚，可取整個小葉直接制片，所以作為實驗的首選材料。
若用菠菜葉作實驗材料，要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。
四．方法步驟：
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步 驟 |
注 意 問 題 |
分 析 |
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1．制片。用鑷子取一片黑藻的小葉，放入載玻片的水滴中，蓋上蓋玻片。 |
制片和鏡檢時，臨時裝片中的葉片不能放干了，要隨時保持有水狀態 |
否則細胞或葉綠體失水收縮，將影響對葉綠體形態和分布的觀察。 |
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2．低倍鏡下找到葉片細胞 |
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3．高倍鏡下觀察葉綠體的形態和分布 |
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4．制作人的口腔上皮細胞臨時裝片 |
在潔凈載玻片中央滴一滴健那綠染液→用牙簽取碎屑→蓋蓋玻片 |
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5．觀察線粒體 |
藍綠色的是線粒體，細胞質接近無色。 |
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討論：
1、細胞質基質中的葉綠體，是不是靜止不動的？為什么？
答：不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動，這種運動能隨時改變橢球體的方向，使葉綠體既能接受較多光照，又不至于被強光灼傷。
2、葉綠體的形態和分布，與葉綠體的功能有什么關系？
答：葉綠體的形態和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多，這可以接受更多的光照。
實驗五：通過模擬實驗探究膜的透性（必修一P60“問題探討”）
一．實驗目的：
1．說明生物膜具有選擇透過性
2．嘗試模擬實驗的方法
二．實驗原理：
某些半透膜（如動物的膀胱膜、腸衣等），可以讓某些物質透過，而另一些物質不能透過。或者（玻璃紙）水分子可以透過，而蔗糖分子因為比較大，不能透過。可以用半透膜將不同濃度的溶液分隔開，然后通過觀察溶液液面高低的變化，來觀察半透膜的選擇透過特性，進而類比分析得出生物膜的透性。
三．方法步驟：
1．取兩個長頸漏斗，分別在漏斗口處封上一層玻璃紙。
2．在A漏斗中注入硫酸銅溶液，B漏斗中注入蔗糖溶液，并加入少許紅墨水，使其略呈紅色。
3．將兩個漏斗分別浸入盛有蒸餾水的燒杯中，在兩漏斗的液面處做標記
4．靜置一段時間后，觀察燒杯中蒸餾水顏色的變化及長頸漏斗的液面變化，并將觀察到的結果設計表格進行記錄。
四．討論：
1．漏斗管內的液面為什么會升高？
答：由于單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數量多于從長頸漏斗滲出的水分子數量，使得管內液面升高。
2．如果用一層紗布代替玻璃紙，漏斗管內的液面還會升高嗎？
答：用紗布替代玻璃紙時，因紗布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不會升高。
3．如果燒杯中不是清水，而是同樣濃度的蔗糖溶液，結果會怎樣？
答：半透膜兩側溶液的濃度相等時，單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數量等于滲出的水分子數量，液面也不會升高。
實驗六 觀察植物細胞的質壁分離和復原（必修一P61“探究”）
一、實驗目的：
1．學會觀察植物細胞質壁分離與復原的方法。
2．了解植物細胞發生滲透作用的原理。
二．實驗原理：
1．質壁分離的原理：當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而失水，細胞液中的水分就透過原生質層進入到溶液中，使細胞壁和原生質層都出現一定程度的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁分離。
2．質壁分離復原的原理：當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過原生質層進入到細胞液中，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態，緊貼細胞壁，使植物細胞逐漸發生質壁分離復原。
二、實驗材料：
紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。
三、實驗步驟：
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步 驟 |
注 意 問 題 |
分 析 |
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1．制作洋蔥表皮的臨時裝片。 在載玻片上滴一滴水，撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平（也可挑取幾條水綿放入水滴中）。蓋上蓋玻片。 |
蓋蓋玻片應讓蓋玻片的一側先觸及載玻片，然后輕輕放平。 |
防止裝片產生氣泡。 |
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2．觀察洋蔥（或水綿）細胞 可看到：液泡大，呈紫色，原生質層緊貼著細胞壁。（或水綿細胞中有帶狀葉綠體，原生質層呈綠色，緊貼著細胞壁。 |
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液泡含花青素，所以液泡呈紫色。
先觀察正常細胞與后面的“質壁分離”起對照作用。 |
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3．觀察質壁分離現象。 從蓋玻片的一側滴入0．3g/ml的蔗糖溶液，在另一側用吸水紙吸引，重復幾次。鏡檢。觀察到：液泡由大變小，顏色由淺變深，原生質層與細胞壁分離。原生質層與細胞壁之間充滿蔗糖溶液。 |
重復幾次 糖液濃度不能過高 |
蔗糖溶液濃度大于細胞液濃度，細胞通過滲透作用失水，細胞壁伸縮性小原生質層的伸縮性大，液泡和原生質層不斷收縮，所以發生質壁分離。 為了使細胞完全浸入蔗糖溶液中。 否則，細胞嚴重失水死亡，看不到質壁分離的復原。 |
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4．觀察細胞質壁分離的復原現象。 從蓋玻片的一側滴入清水，在另一側用吸水紙吸引，重復幾次。鏡檢。觀察到：液泡由小變大，顏色由深變淺，原生質層恢復原狀。 |
發生質壁分離的裝片，不能久置，要馬上滴加清水，使其復原。 重復幾次。 |
細胞液的濃度高于外界溶液，細胞通過滲透作用吸水，所以發生質壁分離復原現象。 因為細胞失水過久，也會死亡。
為了使細胞完全浸入清水中。 |
實驗討論答案：
1．如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現什么現象？
答：表皮細胞維持原狀，因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。
2．當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發生質壁分離？為什么？
答：不會。因為紅細胞不具細胞壁。
實驗七 探究影響酶活性的因素（必修一P78、P83）
一．實驗目的：
1．探究不同溫度和PH對過氧化氫酶活性的影響。
2．培養實驗設計能力。
二．方法步驟：
提出問題→作出假設→設計實驗→（包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格）→實施實驗→分析與結論→表達與交流。
實例1：比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率
一）．實驗原理：
鮮肝提取液中含有過氧化氫酶，過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經計算，質量分數為3.5%的FeCl3溶液和質量分數為20%的肝臟研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+數，大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數的25萬倍。
二）方法步驟：
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步驟 |
注意問題 |
解釋 |
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取4支潔凈試管，編號，分別加入2mL H2O2溶液 |
不讓H2O2接觸皮膚 |
H2O2有一定的腐蝕性 |
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將2號試管放在900C左右的水浴中加熱，觀察氣泡冒出情況，與1號對照 |
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向3號、4號試管內分別滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研磨液，觀察氣泡產生情況 |
不可用同一支滴管
肝臟研磨液必須是新鮮的
肝臟在制成研磨液 |
由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶，會影響實驗準確性
因為過氧化氫酶是蛋白質，放置過久，可受細菌作用而分解，使肝臟組織中酶分子數減少，活性降低
研磨可破壞肝細胞結構，使細胞內的酶釋放出來，增加酶與底物的接觸面積 |
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2-3min后，將點燃的衛生香分別放入3號和4號試管內液面的上方，觀察復燃情況 |
放衛生香時，動作要快，不要插到氣泡中 |
現象：3號試管產生氣泡多，冒泡時間短，衛生香猛烈復燃，4號試管產生氣泡少，冒泡時間長，衛生香幾乎無變化 避免衛生香因潮濕而熄滅 |
實例2：溫度對酶活性的影響
一）實驗目的：
1．初步學會探索溫度對酶活性的影響的方法。
2．探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。
二）實驗原理：
1．淀粉遇碘后，形成紫藍色的復合物。
2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖（淀粉水解過程中，不同階段的中間產物遇碘后，會呈現紅褐色或紅棕色。）麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。
注：市售a-淀粉酶的最適溫度約600C
三）方法步驟：
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操作 |
注意問題 |
解釋 |
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取3支試管，編上號，然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液 |
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另取3支試管，編上號，然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液 |
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將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組，分別放入熱水（約600C）、沸水和冰塊中，維持各自的溫度5min |
不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液 |
防止混合時，由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發生變化，反應溫度不是操作者所要控制的溫度，影響實驗結果。 |
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分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中，搖勻后，維持各自的溫度5min |
保持各自溫度時間不能太短 |
淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間 |
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在3支試管中各滴入1-2滴碘液，搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄 |
碘液不能滴加太多 |
防止影響實驗現象的觀察 |
用表格的形式顯示實驗步驟
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序號 |
加入試劑或處理方法 |
試管 |
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A |
B |
C |
a |
b |
c |
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1 |
可溶性淀粉溶液 |
2mL |
2mL |
2mL |
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/ |
/ |
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新鮮淀粉酶溶液 |
/ |
/ |
/ |
1mL |
1mL |
1mL |
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2 |
保溫5min |
600C |
1000C |
00C |
600C |
1000C |
00C |
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3 |
將a液加入到A試管，b液加入到B試管，c液加入到C試管中，搖勻 |
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4 |
保溫5min |
600C |
1000C |
00C |
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5 |
滴入碘液，搖勻 |
2滴 |
2滴 |
2滴 |
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6 |
觀察現象并記錄 |
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實例3：PH值對酶活性的影響
操作步驟：用表格開式顯示實驗步驟：（注意操作順序不能錯）
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序號 |
加入試劑或處理方法 |
試管 |
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1 |
2 |
3 |
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1 |
注入新鮮的淀粉酶溶液 |
1mL |
1mL |
1mL |
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|
2 |
注入蒸餾水 |
1mL |
/ |
/ |
||
|
3 |
注入氫氧化鈉溶液 |
/ |
1mL |
/ |
||
